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动物实验外包-英瀚斯-南充动物实验

2025/6/13 17:20:25发布10次查看
脑组织组化实验
1. 灌注固定用的针头,一般都用注射针头。灌注大鼠一般可用 10 到 12 号针头,小鼠可用 6、7 号针头,可以做动物实验的公司,但很重要的一点是要把针头的磨钝而不是用锐利的针头。
2. 关于穿刺:灌注大鼠时要把穿刺针的插入到升主动脉内,但不宜进入升主动脉过长,在动脉内见到针头或插入约 1mm 左右即可;灌注小鼠时只要把针头插入左心室内即可,不必要插入到升主动脉内。操作的要点是:,操作要迅速,剪开膈肌后,迅速沿腋前线剪开胸壁,并把胸前壁往上翻,暴露*;第二,一定要在明视野下操作,要剪开心包壁层的前壁,暴露升主动脉和肺动脉干的根部,南充动物实验,确保穿剌针能进入升主动脉;第三,穿刺之前要用适当大小的血管钳夹住心室以固定*,但不要夹得过紧,要让心腔内留有一定的间隙,然后在心尖处轻轻旋转针头插入穿刺针。也可以用小剪刀在心尖处先剪开一个小口再插入穿刺针;第四,穿刺方向要正确,从心尖部开始,从左下方斜向右上方,若遇阻力要改变方向再试,不要用力蛮插。
3. 灌注用生理盐水的量大鼠用 50ml 左右,小鼠用 10ml 左右,一般以从右心耳流出的液体清亮为标准;4% *用量约相当于老鼠体重,如 300 克的老鼠用 300ml 左右。小鼠一般用 20-30ml。灌注速度先快后慢,可持续 1-2 个钟头,实验动物,也可以稍快。取脑后置脑块于 4% *内 4 度后固定 4-6 个钟头。
1.3改良多平台睡眠剥夺法
在mmpm 中将 10 只大鼠(具体数目可根据实际需要确定)同时放在装有 14 或 15 个台的水槽中(长 127 cm ,宽 44 cm ,高 45 cm )进行实验,这样既避免了 sp及m p中单只大鼠与群体隔离的缺点,又保留了 m p 中活动范围*的特点,动物实验外包,因在实验时大鼠多是 3 只或 4 只一笼进行饲养,如 1 组实验需 10 只大鼠,则需要3笼或 4笼大鼠,考虑到来自不同笼的大鼠放在一起实验也可能造成群体的不稳定,有学者将实验方法进一步改良,将实验所需的 10 只大鼠放在同一只笼中饲养 2 周,实验时再将这些大鼠放在一起同时进行睡眠剥夺实验,这样以克服实验时大鼠群体不稳定的缺点,从而将实验时的不确定因素减至低! 实验研究发现在mmpm中经采取措施保持大鼠群体稳定性及避免大鼠与群体分离后 大鼠上腺重量%体重减轻量%中促上腺皮质(a cth )和上腺皮质酮 (co rt) 的含量均较m p中为低,提示m m pm 较 m p 具有更低的应激性,是较为理想的rem 剥夺方法。
注意事项
1. 针头大小与动物的种类有关,t 同时针头一定要磨钝。
2. 检查灌注泵的运作情况,一定排出管子的气泡和空气,防止空气栓塞。
3. 经腹腔暴腔,先清楚升主动脉外面的脂肪组织和心外膜组织。
4. 将针头经左心室插入升主动脉(颜色变白的哦),并用钳子固定。
5. 解开右心耳,同时开启灌注泵。注意,不要随便揭开*的其他部位,否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功,尤其。
6. 将 4 度的生理盐水(好已动物的发白为标准,我们实验室的大鼠约用 250ml)和* (根据所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整个过程均应将动物放在冰上,以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。
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